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用熒光疊氮化物探針通過CuAAC可視化炔烴標(biāo)記的生物分子的一個(gè)主要缺點(diǎn)反應(yīng)是需要去除未反應(yīng)的熒光探針。當(dāng)對細(xì)胞內(nèi)環(huán)境、活體組織成像或?qū)w內(nèi)生物分子進(jìn)行可視化時(shí)，這尤其成問題。去除所有未反應(yīng)的熒光探針的困難也是背景信號和非特異性結(jié)合的主要原因之一。為了克服這一缺點(diǎn)，CarolynBertozzi小組設(shè)計(jì)了熒光疊氮化物探針，通過銅催化或無金屬點(diǎn)擊化學(xué)。這些疊氮化物探針在與炔烴反應(yīng)之前不具有熒光性。已終止在CalFluor中，這些探針具有從綠色到遠(yuǎn)紅色波長的發(fā)射最大值，并且能夠?qū)崿F(xiàn)...

銅螯合配體設(shè)計(jì)的最新進(jìn)展，例如作為穩(wěn)定Cu(I)氧化態(tài)的THPTA或BTTAA水溶液，提高銅催化的動力學(xué)疊氮-炔環(huán)加成(CuAAC)反應(yīng)和大大提高炔烴檢測的靈敏度。銅螯合配體也顯示出增加生物相容性CuAAC反應(yīng)通過防止銅離子引起生物損害1。改進(jìn)CuAAC的下一步反應(yīng)是發(fā)展銅螯合疊氮化合物作為更多反應(yīng)底物。因?yàn)閾?jù)推測疊氮化銅締合是CuAAC催化過程中的限速步驟環(huán)2，在疊氮化物上引入銅螯合部分報(bào)告分子可以顯著提高有效的Cu(I)在反應(yīng)部位的濃度，增強(qiáng)最弱環(huán)節(jié)中的反應(yīng)速率加速(圖2...

通過吸收光，染料分子進(jìn)入電子激發(fā)狀態(tài)。在這種情況下，吸收的能量僅存儲很短的時(shí)間，并在激發(fā)態(tài)的生命周期后再次輻射，例如熒光。在染料溶液中，激發(fā)的染料分子（可視為點(diǎn)偶極子或振蕩器）如果它們之間的距離足夠大，則不會相互影響。因此，集合中存在的發(fā)色團(tuán)的吸收和熒光不會改變。在發(fā)色團(tuán)之間的平均距離約為5-10nm處，影響僅通過振蕩器的“輻射場”發(fā)生，即沒有直接接觸。例如，通過染料分子的模型證明了兩個(gè)染料分子之間的這種相互作用。福斯特共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）描述。如果發(fā)色團(tuán)之間的距離變得更...

熒光壽命的測定吸收光后，分子在釋放吸收的能量之前保持一定時(shí)間的電子激發(fā)態(tài)。在這里，不同的光化學(xué)過程以不同的概率相互競爭。除了無輻射失活外，還可以發(fā)射光，例如以熒光的形式。之后激發(fā)分子數(shù)（n1）已降至1/e的系數(shù)（約37%），稱為熒光壽命（τ佛羅里達(dá)州):n1（t）=n1（0）e（-t/τ佛羅里達(dá)州)有機(jī)染料的衰減行為可以用來識別它。然而，熒光壽命(熒光衰減時(shí)間)不是一個(gè)固定的量，而是受染料所處環(huán)境即溶劑和溫度的影響。ATTO染料的熒光壽命通常在納秒范圍內(nèi)（10-9秒）。對于我...

光的吸收除了在部分或透明的物質(zhì)上發(fā)生折射、散射、干涉和衍射現(xiàn)象外，還可以產(chǎn)生一種顏色印象，如彩虹、蔚藍(lán)的天空、閃閃發(fā)光的肥皂泡、華麗的孔雀羽毛或薄薄的油膜和層，顏色主要通過光的吸收或反射出現(xiàn)在我們的環(huán)境中。物質(zhì)的“色彩”是通過選擇性吸收來自電磁輻射光譜的可見部分的光而產(chǎn)生的。這個(gè)范圍介于紫外線和紅外光之間。在分子水平上，這意味著分子進(jìn)入電子激發(fā)態(tài)：通過吸收光量子（光子），電子從占據(jù)的最高分子軌道上移走（HOMO=h最遠(yuǎn)o被占用m耳目o比妥;能源E1）進(jìn)入最di的未占用分子軌道...

除了熒光的光譜位置外，熒光量子產(chǎn)率（ηfl；英文fluorescencequantumyfield，QY）是熒光團(tuán)的一個(gè)重要光學(xué)參數(shù)。除了消光系數(shù)的大小，當(dāng)染料用作熒光標(biāo)記時(shí)，量子產(chǎn)率的水平特別決定了獲得的信號強(qiáng)度：因此在英語用法中，消光系數(shù)和量子產(chǎn)率的乘積被稱為作為熒光團(tuán)的“亮度”。量子產(chǎn)率本質(zhì)上取決于染料的分子結(jié)構(gòu)，但也受到許多外部因素的影響。這些包括環(huán)境的溫度、粘度、極性和pH值。這種環(huán)境可以由溶劑分子和任何溶劑組成，也可以由例如偶聯(lián)的生物分子或細(xì)胞膜組成，熒光染料位于...